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      Elisa試劑盒實驗時抗原抗體會有什么反應(yīng)?點擊次數(shù):1460 更新時間:2020-09-23

        Elisa試劑盒應(yīng)用的范圍很廣,而且正在不斷地擴(kuò)大,原則上Elisa試劑盒可用于檢測一切抗原、抗體及半抗原,可以直接定量測定體液中的可溶性抗原。Elisa試劑盒的靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性等因素都會影響Elisa檢測的結(jié)果。
       
        在Elisa試劑盒中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后。抗原抗體反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時間,這一保溫過程稱為溫育,有人稱之為孵育,在ELISA中似不恰當(dāng)。
       
        ELISA屬固相免疫測定,抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標(biāo)本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會,只有較貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的過程,因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點。Elisa試劑盒在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。
       
        溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃(冰箱溫度)等。37℃是實驗室中常用的保溫溫度,也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。ELISA試劑盒在建立ELISA方法作反應(yīng)動力學(xué)研究時,實驗表明,兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1-2小時,產(chǎn)物的生成可達(dá)。為加速反應(yīng),可提高反應(yīng)的溫度,有些試驗在43℃進(jìn)行,但不宜采用更高的溫度。抗原抗體反應(yīng)4℃更為*,Elisa試劑盒在放射免疫測定中多使反應(yīng)在冰箱中過夜,以形成zui多的沉淀。但因所需時間太長,在ELISA中一般不予采用。
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